Protein-free Rapid Blocking Buffer | 无蛋白快速封闭液（1×）
货号
BB025
BB025M
BB025L
规格
500mL
500 mL×5
500 mL×10
本产品采用无蛋白配方，避免抗体与封闭剂的非特异结合，可极大降低背景。本产品无内源磷酸化蛋白及生物素，不会干扰磷酸化及生物素检测。因本产品只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，大幅度提高了抗体检测灵敏度。本产品采用优化后的配方，可在5~10min内完成封闭，适用Western Blot转印膜快速高效封闭。
实验原理
技术流程
产品优势
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实验原理/Experimental principle
转印膜（PVDF或硝酸纤维素膜）在吸附蛋白后，膜表面仍存在未被蛋白质占据的疏水区域。本封闭液中的合成聚合物能迅速与膜表面的疏水空位结合，形成致密的分子层，从而阻断后续抗体对膜的非特异性吸附。由于封闭剂分子不含哺乳动物来源的蛋白，不会与抗种属的抗体（如抗鼠、抗兔IgG）发生交叉反应，也避免了磷酸化抗体被封闭剂中的磷酸蛋白干扰。同时，该封闭剂不屏蔽样品蛋白的抗原表位，可在5-15分钟内完成封闭，显著缩短实验时间，获得低背景、高信号的结果。
技术流程/Procedure
1. 将完成转膜后的转印膜放到杂交孵育盒中，加入1×无蛋白快速封闭液，置于摇床轻轻 摇动，室温封闭10~15 min。对于一张6.0×8.0 cm的PVDF膜，推荐使用量10 mL；
注意：通常使用本品封闭10~15 min即可；对于一些背景非常高的抗体，可以将封闭时间延长为30~60 min。如有特殊需要，也可4℃封闭过夜。
2. 封闭后的膜使用TBST清洗1-5 min，即可用于一抗孵育等后续实验。
产品优势/Highlights
✪ 安全无毒
10~15min快速完成封闭；
✪ 沉降迅速
无蛋白配方，只封闭转印膜而不结合蛋白，因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，与传统的脱脂奶粉和 BSA 封闭相比信噪比更高；
✪ 高效还原
无磷酸化蛋白，无生物素，适合磷酸化抗体及生物素检测系统；
✪ 高效还原
使用本封闭液后，所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度，可大大节省抗体使用量。
