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                    双荧光素报告基因实验
双荧光素报告基因实验
检测启动子活性
miRNA对靶基因调控作用
检测周期短
稳定性好
服务特色
双荧光素酶实验的核心特色在于其高灵敏度、内参校正的精准性以及灵活的应用场景,可显著提升研究效率,降低实验偏差,是分子机制研究中的“黄金标准”之一。
服务介绍
服务流程
客户提供
交付内容
服务说明
常见问题

服务介绍/Introduction 

双荧光素酶检测是转录调控研究中十分重要的实验手段,主要应用于启动子和转录因子,以及miRNA和其靶基因互作的验证。

在双荧光素酶检测中,将萤火虫荧光素酶作为实验报告基因,海肾荧光素酶作为对照报告基因。实验报告基因用于测试实验条件下基因的表达,而对照报告基因作为内对照。

以荧光素为底物来检测萤火虫荧光素酶活性,荧光素酶可以催化荧光素,在荧光素氧化的过程中会发出生物荧光,然后通过化学发光仪测定。

双荧光素酶报告基因.png

 适用场景

将待测启动子构建至荧光素酶基因的上游,检测启动子活性;

          在转染启动子荧光报告基因载体的同时转染转录因子的表达载体,检测转录因子与目标启动子的相互作用;

         将miRNA靶基因的3’UTR克隆到含双荧光素酶报告基因载体中,并与miRNA过表达载体或mimics共转染到细胞,检测miRNA对靶基因调控作用。


 特色服务 

 ✪ 全流程服务:服务涵盖全流程实验,高效完整; 

 ✪ 个性化方案:根据实验目的提供专属实验方案及解决方案; 

 ✪ 完整数据链:详实的试验记录、完整的原始数据及详细的技术检测报告,为您的科研保驾护航; 

 ✪ 超长的售后:1年超长售后,含样本保存及疑问解答等。

服务流程/service process

服务流程图3.png

客户提供/Customer provides

样要求

✪  细胞:活细胞≥ 1×107/样(特殊细胞需提供培养基);干冰运输;复苏细胞常温运输。

✪  质粒≥ 1 μg/样,浓度0.5 μg/μL;干冰运输;

✪  甘油菌≥ 100 μL/样,保存1年以上的甘油菌请提前活化;干冰运输;

✪  样本信息:需提供详细的转录因子、目的基因、或microRNA信息。

注:特殊条件及样品请详询。

交付内容/Delivered content

✪  质粒1 μg;

✪ 所有原始数据;

✪  检测实验报告。

注:以上均为常规提供,特殊要求请详询。

服务说明/Service Specification

双荧光.png

常见问题/Service Specification

Q: 分子互作结果无法重复、时有时无,怎么破?
A: 分子互作实验结果难以重复、信号时有时无,核心原因在于细胞批次与代数差异、实验操作未标准化、样本状态不稳定以及弱相互作用易受环境条件波动影响;可通过统一使用同一批次、相同代数的细胞,严格在 4℃、14000 g 条件下裂解 15 min,把控孵育时长并保持全程持续旋转,磁珠提前预洗两次,选用同一批号抗体,关键实验至少设置三次生物学重复与技术重复,以此实现实验流程标准化,保证结果稳定可重复。
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