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                    TurboID
TurboID
高特异性
高空间分辨率
高通量
兼容性强
服务特色
TurboID是一种新的生物素连接酶,它可以将生物素转化为一种共价标记近端蛋白质的反应性中间体,进而将邻近的蛋白质标记上生物素。与BioID使用的生物素连接酶相比,TurboID的催化活性得到大大提升(标记时间从18 hrs缩短至10 min),从而大大的提高了标记效率。
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常见问题

服务介绍/Introduction 

TurboID邻近标记(Proximity labeling, PL)的原理是将TurboID生物素连接酶与诱饵蛋白融合,当诱饵蛋白与靶标蛋白发生互作时,TurboID生物素连接酶通过催化的共价修饰将邻近的蛋白标记上生物素,最后通过亲和素磁珠富集生物素标记的蛋白进行质谱鉴定,从而获得靶标蛋白信息。

蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interactions, PPIs)是细胞生命活动的基础。传统的体内蛋白质相互作用捕获技术如亲和纯化-质谱技术(AP-MS),不能有效地捕获瞬时的或较弱的蛋白相互作用,也不适用于低丰度的蛋白或疏水性较强的膜蛋白,且无法分辨蛋白相互作用发生的细胞区室化信息,存在较多的限制。然而,许多重要的信号转导蛋白如受体激酶以及细胞谱系发生的驱动因子往往具有上述特征,这很大地限制了我们对于细胞活动精细调控过程的认识。

TurboID邻近标记技术就可以克服以上的一些难题,在研究低丰度蛋白的互作蛋白组以及稀有、瞬时细胞类型的细胞、亚细胞蛋白组方面相比传统AP-MS都有明显的优势。

邻近标记原理.jpg

邻近标记流程.jpg

 适用场景

✪ 研究蛋白与蛋白的相互作用;
   寻找目标激酶或者激酶的底物,用于瞬时互作或者弱互作蛋白的筛选;
   用于低丰度的蛋白或疏水性较强的膜蛋白的筛选;
   揭示目的蛋白在体内的互作景观;

 

 特色服务 

 ✪ 全流程服务:服务涵盖全流程实验,高效完整; 

 ✪ 个性化方案:根据实验目的提供专属实验方案及解决方案; 

 ✪ 完整数据链:详实的试验记录、完整的原始数据及详细的技术检测报告,为您的科研保驾护航; 

 ✪ 超长的售后:1年超长售后,含样本保存及疑问解答等。

服务流程/service process

服务流程图3.png

客户提供/Customer provides

样本信息

✪  蛋白信息:名称+物种/登录号/序列;

✪  抗体信息:≥10 μL/样,需明确物种信息、稀释比等;


送样要求

✪  基因模板:基因片段≥ 5μL,浓度≥50 ng/μL;干冰运输;

  组织:动物组织≥0.5 g;植物组织≥1 g;新鲜取材,干冰运输;

✪  质粒:≥4 μg/样;需提供测序结果及抗性等信息;干冰运输;

✪  甘油菌:50 μL/样;保存1年以上的甘油菌需进行活化后送样;冰袋运输;

✪  细胞:≥ 1×107/样;离⼼后收细胞沉淀,沉淀体积约为80-100 μL;干冰运输;复苏细胞常温运输;

注:特殊条件及样品请详询。

交付内容/Delivered content

✪  目的基因的质粒1 μg,测序报告;

  • ✪  SDS-PAGE银染图;

✪  所有原始数据;

✪  检测实验报告。

注:以上均为常规提供,特殊要求请详询。

服务说明/Service Specification

Turbo ID.png

在线课堂/Service Specification

了解更多

常见问题/Service Specification

Q: 邻近标记(BioID/APEX)背景高、标记效率低、假阳性多?
A: 邻近标记实验出现背景偏高、标记效率低且假阳性偏多的问题,主要源于标记时间过长、生物素使用浓度过高、裂解后发生非特异性生物素化修饰以及标记酶活性不足等因素;可分别将 BioID 标记时间控制在 4℃条件下 10–30 min,APEX 采用 1 min 快速标记模式,生物素工作浓度调整为 50–100 μM,样品裂解后利用链霉亲和素磁珠进行严格洗涤,同时设置生物素阴性对照来有效排除背景污染与假阳性干扰。
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