Cn

                    CUT-Tag-qPCR/Seq
CUT-Tag-qPCR/Seq
信噪比高
高分辨率
高灵敏度
低样本量
服务特色
结合了ChIP-seq的优点和基于Tn5转座酶的⽅法,能够快速、⾼效地鉴定染⾊质上蛋⽩质的结合位点。相较于传统的ChIP-seq技术,Cut&Tag具有更快的实验速度、更⾼的分辨率和更低的细胞输⼊要求。
服务介绍
服务流程
客户提供
交付内容
服务说明
常见问题

服务介绍/Introduction 

CUT&Tag(CleavageUnderTargetsandTagmentation),即靶向剪切及转座酶技术,是⼀种利⽤酶锚定技术进行高效、⾼分辨率的DNA测序⽂库构建方法,也是替换传统的ChIP-Seq⽤以研究蛋白质-基因组互作关系研究的新⽅法,属于新⼀代超微量ChIPSeq技术。可用于检测组蛋白、RNApolymeraseII和转录因⼦等具有DNA结合功能的蛋白种类,对表观遗传学、肿瘤和干细胞等领域的研究具有重要意义。

其原理为:在抗体引导下,ChiTag酶仅在目的组蛋白修饰标志、转录因子、染色质调控蛋白结合染色质的局部进行目的 DNA的⽚段化的同时添加测序接头,并释放到细胞外,而绝⼤部分无关的染色质还留在细胞核内,因而整个实验的信噪比大幅提⾼,同时简化了实验步骤。该方法可⼀管式⾼通量应⽤,并可与单细胞测序平台「⽆缝」结合。ChiTag酶在打断基因组的同时加上接头,不需要繁琐的补平加 A加接头,在⼀天内可以完成从细胞到测序⽂库制备全流程。

CUT&Tag 试剂盒-42.jpg

 适用场景

✪ 表观遗传学研究;

✪ 转录因子结合位点分析;

✪ 疾病机制解析、药物筛选与作用机制探索;

✪ 单细胞水平的基因调控研究等多领域。

 

 特色服务 

 ✪ 全流程服务:服务涵盖全流程实验,高效完整; 

 ✪ 个性化方案:根据实验目的提供专属实验方案及解决方案; 

 ✪ 完整数据链:详实的试验记录、完整的原始数据及详细的技术检测报告,为您的科研保驾护航; 

 ✪ 超长的售后:1年超长售后,含样本保存及疑问解答等。

服务流程/service process

服务流程图3.png

客户提供/Customer provides

样本信息

✪  蛋白信息:名称+物种/登录号/序列;

✪  抗体信息:ChIP级抗体≥20 μL/样,需明确物种信息、稀释比等;

送样要求

  组织:动物组织≥0.5 g;植物组织≥1 g;新鲜取材,干冰运输;

✪  质粒:≥4 μg/样;需提供测序结果及抗性等信息;干冰运输;

✪  细胞:≥ 2×106/样;离⼼后收细胞沉淀,CUT-Tag-Seq需沉淀体积约为≥ 50 μL,CUT-Tag-qPCR需沉淀体积约为≥ 80 μL;干冰运输;复苏细胞常温运输;

注:特殊条件及样品请详询。

交付内容/Delivered content

✪  测序数据质量评估

✪  相关基因功能分析

✪  所有原始数据;

✪  检测实验报告。

注:以上均为常规提供,特殊要求请详询。

服务说明/Service Specification

CUT-TAG.png

常见问题/Service Specification

Q: CUT&Tag 实验背景偏高、噪音大,如何降低背景干扰?
A: CUT&Tag 背景高、噪音干扰明显,通常由转座酶用量过高、细胞通透处理过度、洗涤步骤不严谨以及非特异 DNA 切割造成,最新优化方案为降低转座酶工作用量,温和控制细胞通透条件,增加严谨的梯度洗涤步骤去除非特异结合片段,设置阴性对照扣除本底信号,全程把控反应温度与孵育时长,有效压低背景并提高靶向片段富集效率。
Q: 分子互作结果无法重复、时有时无,怎么破?
A: 分子互作实验结果难以重复、信号时有时无,核心原因在于细胞批次与代数差异、实验操作未标准化、样本状态不稳定以及弱相互作用易受环境条件波动影响;可通过统一使用同一批次、相同代数的细胞,严格在 4℃、14000 g 条件下裂解 15 min,把控孵育时长并保持全程持续旋转,磁珠提前预洗两次,选用同一批号抗体,关键实验至少设置三次生物学重复与技术重复,以此实现实验流程标准化,保证结果稳定可重复。
了解更多
售前咨询
Pre-sales consultation
昵称姓名
联系电话
电子邮箱
单位或省市
咨询类型 *
定制方案
报价
申请产品使用
预约演示
咨询内容 *
验证码
我已阅读并接受隐私政策