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                    交联免疫沉淀实验(CLIP-Seq/qPCR)
交联免疫沉淀实验(CLIP-Seq/qPCR)
蛋白质与RNA互作
转录组水平miRNA靶基因分析
服务特色
用于分离和鉴定细胞中核糖核蛋白复合体中的RNAs、microRNAs以及蛋白复合物。
服务介绍
服务流程
客户提供
交付内容
服务说明
常见问题

服务介绍/Introduction 

交联-免疫沉淀法(CLIP可以确定某些RBP是否能与特定的RNA结合并将RBPs与其结合的RNA免疫沉淀下来。

其原理是让活体细胞被暴露在紫外灯下,使得RNA-蛋白结合起来并且可以用免疫共沉淀的方法使特异性的蛋白以及与其结合RNA一同被分离出来,进一步通过高通量测序鉴定RNA类型。

PAR-CLIP-Seq应用于miRNA靶基因分析能够非常明显地降低miRNA结合位点的假阳性预测频率并且减小miRNA结合位点搜寻空间的范围。可以在全基因组范围内鉴定AGO2蛋白在不同RNA上的结合位点。


 适用场景

基础机制研究:RNA结合蛋白(RBP)靶标鉴定、解析转录后调控网络、miRNA作用靶点筛选;

疾病机制与临床研究:神经退行性疾病机理、癌症发生发展。


 特色服务 

 ✪ 全流程服务:服务涵盖全流程实验,高效完整; 

 ✪ 个性化方案:根据实验目的提供专属实验方案及解决方案; 

 ✪ 完整数据链:详实的试验记录、完整的原始数据及详细的技术检测报告,为您的科研保驾护航; 

 ✪ 超长的售后:1年超长售后,含样本保存及疑问解答等。

服务流程/service process

服务流程图3.png

客户提供/Customer provides

样要求

✪  细胞:活细胞≥ 1×107/样(特殊细胞需提供培养基);干冰运输;复苏细胞常温运输。

注:特殊条件及样品请详询。

交付内容/Delivered content

✪  所有原始数据;

✪  检测实验报告。

注:以上均为常规提供,特殊要求请详询。

服务说明/Service Specification

CLIP.png

常见问题/Service Specification

Q: 分子互作结果无法重复、时有时无,怎么破?
A: 分子互作实验结果难以重复、信号时有时无,核心原因在于细胞批次与代数差异、实验操作未标准化、样本状态不稳定以及弱相互作用易受环境条件波动影响;可通过统一使用同一批次、相同代数的细胞,严格在 4℃、14000 g 条件下裂解 15 min,把控孵育时长并保持全程持续旋转,磁珠提前预洗两次,选用同一批号抗体,关键实验至少设置三次生物学重复与技术重复,以此实现实验流程标准化,保证结果稳定可重复。
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