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                    酵母双杂交
酵母双杂交
核蛋白双杂交
膜蛋白双杂交
高通量
假阳性率低
服务特色
可提供酵母杂交文库构建、核酵母双杂交筛选、膜酵母双杂交筛选、酵母单/双杂交验证服务。
服务介绍
服务流程
客户提供
交付内容
服务说明
常见问题

服务介绍/Introduction 

酵母双杂交及系统是一种鉴定和检测蛋白质相互作用的研究方法,因其具有灵敏性高、功能强大、适用范围广等特点,现已被应用于多个研究领域。


核蛋白酵母双杂交:

核蛋白酵母双杂交技术最初由Fields等人在研究酵母转录因子GAL4性质时建立,后续经过不断改进已发展成为一种成熟的蛋白-蛋白互作研究工具,具有简便、灵敏、可反映蛋白在活细胞内互作真实情况的特点,被广泛应用于互作蛋白的筛选、蛋白相互作用的鉴定/验证、蛋白互作机理的探究、蛋白连锁图谱绘制等工作。


膜蛋白酵母双杂交:

该技术技术在传统的酵母双杂交系统的基础上,巧妙地利用分离的泛素系统(split-ubiquitin) 进行蛋白质相互作用的筛选;泛素作为降解信号分子,人为分成两部分:N端 (Nub),C端 (Cub),互补重构的完整泛素分子可被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别,从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。


本平台提供一站式辅助检测,手段方便快捷,得到可靠的实验结论,可同时研究多个蛋白质相互作用,实现高通量筛选和分析,快速获得大量相互作用信息。

04.酵母双杂交.jpg

 适用场景

 蛋白-蛋白互作验证:验证已知互作、筛选新互作蛋白、确定互作结构域等

高通量筛选:以疾病相关转录因子的DNA结合域为诱饵,筛选能够阻断其与DNA结合的小分子化合物。

 

 特色服务 

 ✪ 全流程服务:服务涵盖全流程实验,高效完整; 

 ✪ 个性化方案:根据实验目的提供专属实验方案及解决方案; 

 ✪ 完整数据链:详实的试验记录、完整的原始数据及详细的技术检测报告,为您的科研保驾护航; 

 ✪ 超长的售后:1年超长售后,含样本保存及疑问解答等。


服务流程/service process

服务流程图3.png

客户提供/Customer provides

送样要求

✪  组织:动物组织≥0.5 g;植物组织≥0.5 g;干冰运输;

✪  质粒:≥4 μg/样;需提供测序结果及抗性等信息;冰袋运输;

✪  甘油菌:500 μL/样;保存1年以上的甘油菌需进行活化后送样;冰袋运输;

✪  cDNA:≥ 20 μL/样;无其他核酸污染,需提供序列,能扩增出管家基因;干冰运输;

✪  基因组DNA:≥ 20 μL/样;无其他核酸污染,需提供序列,OD260/280=1.8-1.9,OD260/230=1.9-2.2;干冰运输。

注:特殊条件及样品请详询。

交付内容/Delivered content

✪  文库质粒;

✪  所有原始数据;

✪  检测实验报告。

注:以上均为常规提供,特殊要求请详询。

服务说明/Service Specification

酵母双杂.jpg

常见问题/Service Specification

Q: 分子互作结果无法重复、时有时无,怎么破?
A: 分子互作实验结果难以重复、信号时有时无,核心原因在于细胞批次与代数差异、实验操作未标准化、样本状态不稳定以及弱相互作用易受环境条件波动影响;可通过统一使用同一批次、相同代数的细胞,严格在 4℃、14000 g 条件下裂解 15 min,把控孵育时长并保持全程持续旋转,磁珠提前预洗两次,选用同一批号抗体,关键实验至少设置三次生物学重复与技术重复,以此实现实验流程标准化,保证结果稳定可重复。
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