实验原理/Experimental principle
本试剂盒是检测 Cdc42 小 GTP 酶活化水平的专用工具,基于GST-Pak1-PBD 与活化型 Cdc42-GTP 的特异性结合原理实现目标蛋白的 pull-down 富集,搭配专属 Cdc42 抗体完成 Western blot 检测,同时提供 GTPγS(阳性对照)和 GDP(阴性对照)核苷酸,可体外制备活化 / 失活 Cdc42 对照样品,实验操作简便、结果特异性高且重复性好。
Cdc42 小 GTP 酶(约 22kDa)是细胞信号转导中的关键分子开关,与 GTP 结合时为活化状态(Cdc42-GTP),核心调控肌动蛋白细胞骨架组装和基因转录,激活后可促进肌动蛋白聚合形成丝状伪足或微棘,且与整合素复合物相关,还能激活 Rac 蛋白,使丝状伪足延伸常与片状伪足突起相关联;与 GDP 结合时为失活状态(Cdc42-GDP),无生物学活性。本试剂盒中的 GST-Pak1-PBD可特异性识别并结合人、小鼠、犬、大鼠等物种的活化型 Cdc42-GTP,通过谷胱甘肽琼脂糖树脂的亲和吸附作用将其从细胞裂解液中分离,再经 Western blot 定量检测,实现 Cdc42 活化水平的精准分析。
技术流程/Procedure
产品优势/Highlights
✪ 独立研发,具有自主知识产权;
✪ 操作简单、耗时短、结果客观准确;
✪ 试剂配套完整,开盒即用;
✪ 高质量质控,批间稳定。