实验原理/Experimental principle
NP-40裂解液基于非离子型去污剂NP-40的温和裂解作用，通过插入细胞膜脂双层破坏膜结构完整性，释放胞浆及细胞膜可溶性蛋白，同时由于不含SDS、脱氧胆酸钠等强离子型去污剂且对核膜破坏能力较弱，能够有效保留蛋白天然构象及蛋白-蛋白相互作用；在缓冲盐体系维持稳定pH及离子强度的条件下，配合蛋白酶抑制剂防止目标蛋白降解，裂解产物经离心去除不溶性碎片及细胞核后获得的上清即可用于免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP）、酶活性检测、Western Blot及ELISA等下游实验。
技术流程/Procedure
一、样本准备
细胞样本：弃去培养液，用预冷PBS洗涤2-3次。
组织样本：剪取适量组织块（约50–100 mg），用预冷PBS洗涤2-3次。
二、裂解液准备
根据实验需求选择合适强度的RIPA裂解液（强/中/弱）。使用前加入蛋白酶抑制剂（如PMSF，终浓度1 mM）混匀备用。
三、 裂解操作
细胞：每1×10⁶个细胞加入150–250 μL RIPA裂解液，冰上吹打混匀。
组织：加入5–10倍体积RIPA裂解液，使用匀浆器或超声破碎仪充分匀浆，4°C裂解30分钟。
四、离心收集
4°C，12,000–14,000 × g 离心15分钟。取上清（即总蛋白提取液）转移至新预冷EP管中。
五、 定量与保存
使用Bradford 蛋白定量试剂盒或BCA蛋白定量试剂盒（货号：BQK001/BQK003）测定蛋白浓度。分装后于-20°C或-80°C保存，避免反复冻融。
产品优势/Highlights
✪ 温和高效
有效裂解细胞膜而不破坏蛋白天然构象，适合IP、Co-IP等需保留蛋白活性的实验；
✪ 使用便捷
产品自带蛋白酶抑制剂PMSF,按比例混匀即可使用；
✪ 兼容性强
缓冲体系兼容Western blot、IP、BCA/Bradford定量等实验。