红细胞裂解液基于低渗裂解原理，利用氯化铵（NH₄Cl）作为核心裂解成分，在低渗环境下水分优先进入渗透压耐受能力较弱的红细胞内，导致红细胞膜破裂并释放血红蛋白，同时碳酸氢钾（KHCO₃）和EDTA分别用于维持稳定的pH环境及抑制金属蛋白酶活性、防止细胞聚集。由于白细胞、淋巴细胞等有核细胞的细胞膜结构更为坚韧且具有更强的渗透压调节能力，在短时间的低渗处理中能够保持完整。

一、样本准备

全血样本：采集新鲜抗凝全血（EDTA、肝素或枸橼酸钠抗凝均可），如为4°C保存样本，需恢复至室温后再进行裂解。

组织样本（骨髓、脾脏等）：将组织剪碎后使用研磨器或注射器芯轻柔研磨，通过70 μm细胞筛过滤，用PBS重悬制备单细胞悬液。

二、裂解操作

按1:10比例将样本与红细胞裂解液混合（例如100 μL全血加入1 mL裂解液，或1×10⁷个细胞沉淀加入1 mL裂解液）；轻轻吹打或颠倒混匀，确保样本与裂解液充分接触；室温裂解5-10分钟，期间可轻柔颠倒混匀1-2次。

（注意：裂解时间不宜超过15分钟，否则可能损伤有核细胞。）

三、离心收集有核细胞

将裂解产物转移至离心管中，4°C、400-500 × g离心5-10分钟；离心后可见白色或淡粉色沉淀（有核细胞），上清为裂解释放的血红蛋白溶液；小心弃去上清，注意不要吸走沉淀。

四、洗涤（可选，推荐）

加入1 mL预冷PBS或培养基重悬沉淀；4°C、400-500 × g离心5分钟，弃上清；重复洗涤1-2次，以彻底去除残留的血红蛋白和裂解液成分。