本产品基于非离子型去污剂（如Triton X-100或NP-40）的温和裂解作用，通过去污剂分子插入细胞膜脂双层，选择性破坏细胞膜结构完整性，释放胞浆蛋白及膜结合蛋白，同时由于不含SDS、脱氧胆酸钠等强离子型变性去污剂，能够最大程度保留蛋白的天然构象、生物学活性及蛋白-蛋白相互作用。

一、样本准备

细胞样本：弃去培养液，用预冷PBS洗涤细胞2次，尽量吸尽残留液体。

组织样本：剪取适量新鲜或冻存组织（约50-100 mg），用预冷PBS洗净血污，剪成细小碎片。

二、裂解液准备

将抽提试剂从-20°C取出，冰上解冻或室温解冻后置冰上备用，临用前添加蛋白酶抑制剂。

三、裂解操作

细胞样本：每1×10⁶个细胞加入150-250 μL抽提试剂，轻轻吹打混匀。

组织样本：每100 mg组织加入500-1000 μL抽提试剂，使用组织匀浆器或超声破碎仪（低温、低功率）充分匀浆。4°C旋转或轻轻振荡裂解15-30分钟。

四、离心收集蛋白

将裂解产物转移至预冷离心管中，4°C、12,000-14,000 × g离心15-20分钟；离心后沉淀为细胞碎片及细胞核，上清为活性蛋白提取液；小心吸取上清，转移至新的预冷EP管中，避免触及沉淀。

五、定量与保存

使用BCA蛋白定量试剂盒（货号：BQK003）测定蛋白浓度（不建议使用Bradford法）。分装后置于-20°C或-80°C保存，避免反复冻融。