本产品基于非离子型去污剂（如Triton X-100、NP-40）的温和裂解作用，通过去污剂分子插入昆虫细胞膜脂双层，有效破坏细胞膜结构完整性，释放胞浆蛋白及可溶性膜蛋白。由于不含SDS、脱氧胆酸钠等强离子型变性剂，裂解过程在非变性条件下进行，能够最大程度保留蛋白的天然构象、酶活性及蛋白-蛋白相互作用。裂解液中预混的蛋白酶抑制剂可有效抑制昆虫细胞中高活性的内源性蛋白酶，防止目标蛋白降解。

一、样本准备

昆虫细胞样本：收集悬浮细胞或消化贴壁细胞，4°C、500 × g离心5-10分钟，弃上清，用预冷PBS洗涤1-2次。

昆虫组织样本：取新鲜或冻存组织（如蚕蛹、幼虫等），称重后剪成细小碎片，用预冷PBS洗净血污。

二、裂解液准备

将抽提试剂从-20°C取出，冰上解冻。临用前加入蛋白酶抑制剂，混匀后置冰上备用。

三、裂解操作

昆虫细胞样本：每1×10⁷个细胞加入200-500 μL抽提试剂，轻轻吹打重悬。

昆虫组织样本：每100 mg组织加入500-1000 μL抽提试剂。

冰上裂解20-30分钟，期间每5-10分钟轻轻颠倒混匀或振荡一次。

四、辅助裂解（组织样本推荐）

对于昆虫组织样本，建议配合机械破碎：

组织匀浆器：冰上匀浆20-30次，至无明显组织块。

液氮研磨：将组织在液氮中研磨成粉末后加入裂解液。

超声破碎：冰浴条件下超声3-5次（每次10-15秒，间隔30秒），功率不宜过高。

五、离心收集蛋白

将裂解产物转移至预冷离心管中，4°C、12,000-14,000 × g离心15-20分钟；离心后沉淀为细胞碎片及不溶性组织成分，上清为活性蛋白提取液；小心吸取上清，转移至新的预冷EP管中，避免触及沉淀。

六、定量与保存

使用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度，分装后置于-20°C或-80°C保存，避免反复冻融。