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柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
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柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
Universal Total Protein Extraction Kit with Lysis Buffer and Spin Column | 柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
货号
BE015A
调试1
测试1
规格
100mL
调试2
调试3
测试2
测试3
柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒是一种基于离心柱技术的快速蛋白提取试剂盒,用于从动物组织和细胞中高效提取总蛋白,适用于Western Blot、ELISA、质谱鉴定等下游实验。 本产品采用离心柱配合优化裂解液,可实现样本同步裂解与过滤分离,15-20分钟即可完成提取。与传统RIPA法相比,操作更简便、蛋白得率更高,且能有效去除基因组DNA、多糖、色素等干扰物质,无需额外核酸酶处理。
实验原理
技术流程
产品优势
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实验原理/Experimental principle

本产品基于离心柱技术与优化裂解液的协同作用:专用裂解液中含有高效去污剂组合(含非离子型及两性离子型去污剂),能够快速破坏细胞膜、细胞器膜及组织基质结构,释放细胞内的总蛋白;裂解完成后,将裂解产物转移至离心柱中离心,离心柱内的特殊滤膜或树脂能够选择性结合蛋白或允许蛋白通过,同时有效截留基因组DNA、细胞碎片、多糖、色素等杂质,一步离心即可实现蛋白与干扰物的分离。提取的蛋白样品建议使用BCA蛋白定量试剂盒进行浓度测定。


技术流程/Procedure

一、样本准备

细胞样本:弃去培养液,用预冷PBS洗涤细胞1-2次,收集细胞沉淀。

组织样本:取新鲜或冻存组织(10-30 mg),剪成细小碎片,用预冷PBS洗净血污。


二、裂解液准备

将裂解液从-20°C取出,冰上解冻。如产品未预混蛋白酶抑制剂,临用前添加PMSF至终浓度1 mM。


三、裂解操作

细胞样本:每1×10⁶个细胞加入100-200 μL裂解液,轻轻吹打混匀。

组织样本:每10 mg组织加入100-200 μL裂解液,使用匀浆器或研磨棒充分匀浆。

冰上裂解5-10分钟,期间可轻轻振荡2-3次。


四、柱式过滤

将离心柱放入收集管中,将裂解产物全部转移至离心柱内。室温或4°C、12,000-14,000 × g离心1-2分钟。离心后收集管中的液体即为总蛋白提取液,离心柱内截留DNA及细胞碎片。


五、定量与保存

使用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。分装后置于-20°C或-80°C保存,避免反复冻融。

产品优势/Highlights

柱式纯化,无需离心

采用离心柱设计,无需超速离心步骤,有效去除细胞碎片与核酸杂质,获得高纯度总蛋白

快速简便

从样本到蛋白产物仅需10-15分钟,操作流程标准化,减少人为误差,适合高通量样本处理

兼容性强

抽提产物不含干扰物质,可直接用于Western blot、BCA定量、酶活性检测及质谱分析等下游实验


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