实验原理/Experimental principle
本试剂盒基于传统Western blot间接检测原理,通过预制胶、高效封闭液、优化抗体稀释液及快速洗涤液等协同优化,将总实验时间从1-2天压缩至4小时内。其流程为:SDS-PAGE分离蛋白后转印至膜,经快速封闭后,依次与用户自备的一抗和HRP标记二抗孵育,最后加入化学发光底物,在HRP催化下产生425 nm光子,通过胶片或成像仪捕获信号,实现目标蛋白的飞克级灵敏检测。
技术流程/Procedure
1.电泳:使用预制胶,加入电泳液后200V恒压电泳30分钟;
2.转膜:电泳完成后,加入转膜液,600mA恒流转膜18-22分钟;
3.封闭:转膜完成后,加入封闭液,室温摇床封闭10分钟
4.抗体孵育:弃去封闭液,加入提前用抗体稀释液稀释的抗体,室温摇床一抗孵育60分钟,二抗孵育40分钟;
5.洗涤:弃去抗体液,加入Western洗涤液,室温摇床洗涤10分钟(重复3次);
6.检测:配制ECL工作液(A液:B液=1:1),覆盖印迹膜孵育0.5分钟,进行化学发光成像。
产品优势/Highlights
✪超快速检测
实验时间从传统1-2天缩短至最快3.6小时,为科研人员节省宝贵时间;
✪ 操作简便
包含完整实验所需绝大部分试剂与耗材,仅需自备水、乙醇和目标蛋白一抗,简化操作流程;
✪灵敏度高
配方确保飞克级高检测灵敏度和极低背景,条带清晰锐利,结果稳定可靠。