实验原理/Experimental principle
本试剂盒基于银染法检测蛋白条带的原理。银染是利用银离子(Ag⁺)与蛋白质中的特定基团(如羧基、巯基、咪唑基、氨基等)结合,经还原剂作用后,银离子被还原为金属银,沉积在蛋白质所在位置,形成深棕色至黑色的可见条带。
技术流程/Procedure
1.电泳结束:SDS-PAGE或Native-PAGE电泳完成后,将凝胶取出,放入洁净的玻璃或塑料器皿中(建议佩戴无粉手套操作,避免指纹污染);
2.固定:加入固定液,室温摇床孵育20-30分钟,弃去固定液;
3.洗涤:加入去离子水或超纯水,摇床洗涤10-15分钟,弃去洗涤液(重复2次);
4.增敏:加入增敏液,室温摇床孵育10-15分钟,弃去增敏液;
5.洗涤:加入去离子水或超纯水,摇床洗涤5分钟,弃去洗涤液(重复2次);
6.银染:加入银染液,室温摇床孵育10-15分钟,弃去银染液;
7.洗涤:加入去离子水或超纯水,快速洗涤30秒-1分钟(时间不宜过长),弃去洗涤液;
8.显色:加入显色液,室温摇床孵育,观察条带出现(通常3-10分钟),待条带清晰后立即终止;
9.终止:加入终止液,室温摇床孵育10分钟,终止显色反应;
10.保存:弃去终止液,加入去离子水浸泡凝胶,可拍照保存或用于后续分析
产品优势/Highlights
✪ 灵敏度极高
检测下限可达纳克(ng)级别,比考马斯亮蓝染色灵敏50-100倍,可检测低丰度微量蛋白;
✪ 快速简便
全程仅需30-40分钟即可完成染色,无需过夜处理,大幅缩短实验周期,提高工作效率;
✪ 操作简单
提供全套预配试剂,按说明书依次处理即可,无需复杂配制。