实验原理/Experimental principle
本产品基于SDS-PAGE电泳中蛋白质变性和电荷均一化的基本原理。SDS可与蛋白质结合，使其带上大量负电荷并展开为棒状构象，消除蛋白质原有的电荷差异和形状差异，使电泳迁移率仅取决于分子量大小。本产品不含还原剂（如DTT或β-巯基乙醇），可保留蛋白质原有的二硫键及亚基间相互作用，使多亚基蛋白维持原有的寡聚体状态，适用于检测蛋白天然构象、二硫键连接方式以及抗体等非还原条件下的多聚体形式分析。
技术流程/Procedure
一、样品准备
将待测蛋白样品（如细胞裂解液、组织匀浆、纯化蛋白等）与上样缓冲液按适当比例混合。建议体积比为4:1（样品:缓冲液），确保缓冲液过量以保证充分变性。如样品浓度较低，可适当减少缓冲液用量。
二、加热变性
将混合后的样品置于37℃加热5-10分钟，使蛋白质充分变性和二硫键断裂。对于膜蛋白或结构紧密的蛋白，可适当延长加热时间至10-15分钟。加热后瞬时离心，收集管壁凝结的液体。
三、上样
待样品冷却至室温后，用移液器吸取适量样品（根据加样孔容量，通常10-30 μL）小心加入SDS-PAGE凝胶的加样孔中。由于本品具有即沉特性，样品加入后会快速沉降于孔底，不易扩散至相邻孔，但上样时仍需避免移液器尖端刺破凝胶或触及其他加样孔。
四、电泳
按常规SDS-PAGE电泳条件进行电泳，待溴酚蓝指示剂到达凝胶底部时结束电泳。
五、后续检测
电泳结束后取出凝胶，进行考马斯亮蓝染色、银染或Western Blot转印检测。
产品优势/Highlights
✪ 非还原配方
不含DTT或β-巯基乙醇等还原剂，保留蛋白二硫键及天然高级结构；
✪ 即用便捷
5×浓缩液设计，按比例稀释即可使用，无需额外添加还原剂，简化上样前处理流程；
✪ 沉降快速
“即沉”配方确保蛋白在加样孔中快速沉降，减少扩散与条带弥散，上样更轻松，结果更清晰。