实验原理/Experimental principle
本产品基于丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺在催化剂存在下聚合形成聚丙烯酰胺凝胶的原理。在改良型促凝剂（替代传统TEMED）的催化下，丙烯酰胺单体发生自由基聚合反应，形成三维网状结构。蛋白质在电场中通过该网状结构时，因其分子量大小和形状不同而受到不同的筛分阻力，从而实现分离。较大分子量的蛋白质迁移较慢，较小分子量的蛋白质迁移较快，最终在凝胶中按分子量由大到小排列成条带。
本产品采用预混配方，下层胶（分离胶）浓度为6%，凝胶孔隙相对较大，特别适合90-180 kDa范围内高分子量蛋白质的分离。上层胶（浓缩胶）浓度为4%，可将蛋白样品压缩成窄带，提高分辨率。上层胶中预加入彩色染料，使点样孔清晰可见，但该染料不参与聚合反应，也不与蛋白质结合，在电泳过程中不会进入下层胶，不影响后续电泳、转印或染色结果。改良型促凝剂具有稳定的催化活性，无需添加TEMED即可实现快速凝胶（室温约10分钟），避免刺激性异味。
技术流程/Procedure
（以一块0.75/1.0/1.5 mm的胶为例）
1. 取等体积下层分离胶缓冲液A和下层分离胶缓冲液B。A液，B液各2.0/2.7/4.0 mL，轻柔混匀；
注意：由于染料的特殊理化性质，使用前请摇匀。
2. 向步骤1的混合溶液中加入40/54/80 μL的改良型促凝剂，轻轻混匀，将混匀后的溶液注入制胶玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5cm即可，加入适量 乙醇覆盖于下层胶之上；
3. 待下层胶凝固后(约10-15 min)，倒去上层乙醇；
注意：(1) 此溶液为过量，请勿全部注入。
(2) 加入改良型促凝剂后，需轻柔混匀，防止过多氧气混入胶溶液，抑制凝胶聚合。
4. 取等体积上层浓缩胶缓冲液A和上层浓缩胶缓冲液B。A液，B液各0.5/0.75/1.0 mL， 轻柔混匀；
5. 向步骤4的混合溶液中加入10/15/20 μL的改良型促凝剂，轻轻混匀，即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中，插入梳齿；
注意：加入改良型促凝剂后，需轻柔混匀，防止过多氧气混入胶溶液，抑制凝胶聚合。
6. 待胶凝固后(10~15 min)，拔去梳齿即可用于电泳；
注意：请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
产品优势/Highlights
✪ 快速制备
10min快速凝胶，短时间即可灌制多块凝胶；
✪ 彩色上层
可制备红黄蓝绿紫颜色的上层胶，为点样和区分不同凝胶提供便利；
✪ 条带清晰
尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰；
✪ 避免异味
无需使用TEMED，避免恶臭气味。
